〔摘要〕目的：分析T大颗粒淋巴细胞白血病（T–LGLL）的血液病理学特点。方法：选择平顶山市第一人民医院2020年1月至2020年12月收治的19例T–LGLL患者，对患者髂前或髂后上棘部位进行骨髓抽取，使用瑞特染色，样本处理之后使用中性甲醛固定，观察苏木精–伊红（HE）染色外观形态。结合收集到的样本资料进行细胞学检测分析、骨髓涂片检测分析、病理学分析。结果：19例患者中，血红蛋白42~158g·L-1，16例患者＜100g·L-1，血小板（10~337）×109·L-1，6例患者＜100×109·L-1。白细胞（2.5~17.8）×109·L-1，10例患者＜4.0×109·L-1。患者外周血白细胞分类，淋巴细胞比例为0.33~0.95，大颗粒淋巴细胞（LGL）为0.18~0.85，外周血LGL绝对数值（0.57~13.5）×109·L-1，不同患者分别呈现出不同的骨髓增生活跃度，患者或表现较轻，或表现较为明显。淋巴细胞数值0.09~0.90，淋巴细胞比例＞0.2的有2例。患者增生较低下1例，增生大致正常5例，增生活跃13例。骨髓活检分析可见，患者出现增生低下、增生活跃、淋巴细胞增多现象。淋巴细胞增生之后，体积逐渐减小，外形上呈现出卵圆或者不规则圆形，淋巴细胞主要分布于造血细胞，呈间质型分布，3例患者出现淋巴细胞聚集灶。全部患者均未出现骨髓坏死、噬血细胞。17例患者进行单个核细胞T细胞受体（TCR）γ基因重排检测，其中检测阳性患者12例。结论：为了提升T–LGLL检测结果的精准性与检测效率，可以联合运用免疫表型、外周血、分子遗传学检测方式。
〔关键词〕T大颗粒淋巴细胞白血病；血液病理学；细胞学检测；骨髓涂片检测
淋巴细胞白血病中2%~3%为T大颗粒淋巴细胞白血病（T–celllargegranularlymphocyteleukemia，T–LGLL），该疾病呈现出典型的血液病理学特征，患者外周血或者骨髓中大颗粒淋巴细胞（largegranularlymphocyte，LGL）呈现单克隆性增生的特征[1]。对T–LGLL的诊断需要综合分析患者临床症状表现及形态学等特征，并对患者进行分子遗传学检查，在此分析之上综合得出患者各项病情表现等[2]。基于此，本研究探讨了该疾病的病理学特征，以此促进对T–LGLL的病症诊断与治疗，结果报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料选择本院2020年1月至2020年12月收治的19例T–LGLL患者，其中男14例，女5例，患者年龄20~71岁，平均年龄（46.0±9.0）岁。（1）纳入标准：患者外周血T–LGL持续增多，淋巴细胞总数在（2~20）×109·L-1；患者具备特征性的免疫表型：CD3+CD8+CD57+CD16+TCRαβ+CD4-CD56-；知情同意本研究。（2）排除标准：合并其他恶性肿瘤患者；合并心、肺功能异常者；妊娠患者。1.2方法选取患者髂前或髂后上棘部位进行骨髓抽取，使用瑞特染色，对选取的样本进行一定处理，使用4%中性甲醛固定，观察苏木精–伊红（hematoxylin–eosin，HE）染色外观形态。按照不同的类别计数骨髓有核细胞（200个）、瑞特染色外周血白细胞数量（100个），运用五级划分法分析19例患者骨髓活检增生程度，对此进行辨别分析。使用美国BD公司出产的流式细胞仪采集患者外周血或骨髓单个核细胞，并对收集的样本进行四色免疫荧光染色处理，结合参数选取对患者进行免疫表型。运用EliVision二步法对患者样本进行免疫组织化学检测，选用适合石蜡切片的抗体CD57、CD4、颗粒酶B、抗体CD3、T细胞内抗原1（Tcellintracellularantigen1，TIA1），检测过程中对患者使用Sigma公司产品生产的显色剂二氨基联苯胺（diaminobenzidine，DAB），对搜集到的患者样本进行骨髓T细胞受体（Tcellreceptor，TCR）γ基因重排分析。1.3观察指标T–LGLL患者诊断中，阳性结果判断指标：流式细胞仪检测阳性细胞≥20%，阴性结果判断指标：流式细胞仪检测阳性细胞＜20%，结合收集到的样本资料分别对患者进行细胞学检测分析、骨髓涂片检测分析、病理学分析。
2结果
2.1细胞学检测分析对全部患者进行血常规检测分析可见，血红蛋白42~158g·L-1，16例患者＜100g·L-1，血小板（10~337）×109·L-1，6例患者＜100×109·L-1，白细胞（2.5~17.8）×109·L-1，10例患者＜4.0×109·L-1。通过对患者外周血涂片检测分析可见，17例患者出现LGL，患者胞质中出现苯胺蓝颗粒。观察患者外周血白细胞分布情况，患者LGL数值范围0.18~0.85，淋巴细胞数值范围0.33~0.95，外周血LGL数值范围（0.57~13.5）×109·L-1，其中7例患者＞2.0×109·L-1。2.2骨髓涂片检测分析通过对患者骨髓样本的分析可见，不同患者分别呈现出不同的骨髓增生活跃度，或表现较轻，或表现较为明显。淋巴细胞数值0.09~0.90，淋巴细胞比例＞0.2的有2例。所有检测对象均未呈现出原始粒红系细胞增多现象。病态造血即粒红系细胞发育异常现象3例，红细胞比例明显减少现象出现14例，对5例患者诊断分析出现T–LGLL合并纯红细胞再生障碍贫血。对患者骨髓及外周血检测分析可见出现LGL，2例患者骨髓中出现LGL但是外周血未出现，4例患者骨髓中未见LGL但是外周血中检测发现。2.3病理学分析通过骨髓活检分析可见，患者增生较低下1例，增生大致正常5例，增生活跃13例。淋巴细胞增多患者共计16例，其中轻中度、重度分别12例、4例。检测发现未出现淋巴细胞增多患者3例。淋巴细胞增生之后，体积逐渐减小，外形上呈现出卵圆或者不规则圆形，核仁表现不明显几乎察觉不到，或者根本无存在。判断患者淋巴细胞分布情况，淋巴细胞呈间质型分布有16例，主要分布在造血细胞之间。其中3例患者出现淋巴细胞聚集灶。8例患者分布在血窦位置。4例患者小梁旁出现淋巴细胞结节，表现较为明显。8例患者出现嗜酸粒细胞增多现象。3例出现浆细胞增多，从整体上分析，全部患者均未出现骨髓坏死、噬血细胞，见封三图1。2.4细胞遗传学分析对15例患者进行检测分析发现均呈现出正常核型状态。对患者进行分子遗传学分析，17例患者中12例呈现出单个核细胞TCRγ基因重排状态。
3讨论
T–LGLL患者体内胞质中呈现出淋巴细胞克隆性增殖特征，为一种较为成熟的T/NK细胞淋巴瘤，虽然当前临床中不太常见，也应当对其构建相应的分析机制[3]。T–LGLL常见的疾病分型包括NK–LGLL、T–LGLL，其中4/5的患者类型为T–LGLL，也被称之为Tγ淋巴细胞增生症、T–慢性淋巴细胞白血病，具体又分为T–LGLL、侵袭性自然杀伤细胞白血病（aggressiveNKcellleukemia，ANKL）两种形式，T–LGLL疾病具有较长病程，疾病发展呈现出较强的隐藏性，症状表现不够明显，诊断难度较高[4]。ANKL属于NK细胞引发的疾病类型，患者病情往往在短期内迅速发展，易于诊断，治疗中患者预后较差。临床T–LGLL疾病高发人群为老年人，疾病初期阶段表现不明显，增加了对患者疾病诊断的难度，病情发展到一定程度之后，患者呈现出脾大、贫血以及感染等症状，与患者自身免疫情况相结合，同时可能出现其他合并性疾病[5]。随着患者疾病的演进，LGL逐渐增多，半年之后数量达到2.0×109·L-1。瘤细胞临床表现呈现出了CD2+CD3+CD8+CD57+免疫表型特征。结合以上病情分析，该疾病病发的潜在危险人员为类风湿性关节炎伴粒细胞减少、中性粒细胞周期性减少、中性粒细胞减少、淋巴细胞增多等人员，诊断过程中应当对患者进行骨髓、外周血检测，为了降低漏诊与误诊率，对患者淋巴细胞进行分析，提升对患者诊断效率。细胞毒性T细胞标记为T1A1，颗粒酶B只在活化细胞中有表达，但是活化或者非活化细胞毒性T细胞均有表达。本研究中全部病例肿瘤细胞均不表达颗粒酶B。史颖颖等人[1]研究提出CD10在外周T细胞淋巴瘤中可表达，CDla在淋巴母细胞淋巴瘤的表达率较低。髓系肿瘤中CD7具有非特异性，但是并非全部病例均能够呈现出该特征，因此在研究中需要联合运用CD2+CD3+CD8+CD57+标志物。高献争等[3]采用了流式细胞技术进行分析，得出9例T细胞淋巴瘤/白血病患者中肝脾T细胞淋巴瘤4例，T–LBL/ALL患者5例。本研究中对19例T–LGLL患者进行病理学分析，进行细胞学检测分析、骨髓涂片检测分析、病理学分析。通过检测分析可见患者LGL数值范围0.18~0.85，淋巴细胞数值范围0.33~0.95，外周血LGL数值范围（0.57~13.5）×109·L-1，其中7例患者＞2.0×109·L-1。综上所述，本研究分析了T–LGLL的血液病理学特征，骨髓活检分析可见，患者出现增生低下、增生活跃、淋巴细胞增多现象。淋巴细胞主要分布于造血细胞，呈间质型分布，联合对患者运用免疫表型、外周血、分子遗传学检测方式，提升检测结果的精准性与检测效率。
〔参考文献〕
〔1〕史颖颖，冯金梅，黄丽霞，等．熊果酸对脂多糖诱导的人髓系白血病单核细胞来源巨噬细胞炎性因子的调节作用〔J〕．中国临床药理学杂志，2021，37(13)：1663-1667．
〔2〕魏计锋，仇惠英，陈泽，等．TET2、IDH1基因突变在老年急性髓系白血病中的研究〔J〕．临床血液学杂志，2021，34(7)：502-505．
〔3〕高献争，魏建国，李晟磊，等．纵隔T淋巴母细胞淋巴瘤/白血病61例临床病理学特征及预后〔J〕．中华病理学杂志，2020，49(6)：601-606．
〔4〕彭贤贵，杨武晨，李佳，等．细胞形态相关技术在血液系统肿瘤中的应用〔J〕．中国生物工程杂志，2019，39(9)：84-90．
〔5〕王雯娟，巩辉，王锦程，等．淋巴瘤细胞白血病患者病理免疫组化及骨髓流式免疫分型结果对比及临床指导意义〔J〕．中国实验血液学杂志，2020，28(5)：1486-1490．
作者：陶毅森 陈超华 单位：平顶山市第一人民医院
