出血性疾病的筛选试验常有(急性创伤出血病人、和α的检测)

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【关键词】 创伤和损伤;出血;白细胞介素6;白细胞介素8;肿瘤坏死因子α

【摘要】 目的 探讨急性创伤出血病人白细胞介素6(il6)、白细胞介素8(il8)和肿瘤坏死因子α(tnfα)变化及其意义。方法 将外伤30 min内急诊病人分为软组织挫伤伴出血组(a组)25例、锐器刺割伤致出血组(b组)25例，以健康体检者25例作为对照组(c组)。取外周血浆标本，采用酶联免疫分析(elisa)法检测il6、il8和tnfα水平。结果 a组和b组il6水平均升高，且a组升高明显，3组间相比较差异均有统计学意义(f=21.750,q=3.559～6.994，p<0.01)。a组il8水平明显升高，且与b、c组相比较差异均有统计学意义(f=55.314，q=7.382、7.843，p<0.01)。a组tnfα水平明显升高，且与b、c组相比较差异均有统计学意义(f=3.504，q=2.024、2.393，p<0.05)。结论 急性挫伤伴出血比锐器刺割伤致出血更易引起il6、il8、tnfα水平升高，提示创伤后急性失血时免疫细胞分泌大量炎性因子，加重组织损伤。

【关键词】 创伤和损伤;出血;白细胞介素6;白细胞介素8;肿瘤坏死因子α

　detection of il6, il8, and tnfα in patients with acute traumatic hemorrhage wang jun, gao meihua (department of immunology, qingdao university medical college, qingdao 266071, china); [abstract] objective to investigate the changes and their significance of il6, il8, and tnfα in patients with acute traumatic bleeding. methods patients injured within 30 minutes were enrolled in this study, 25 in each group: patients with bleeding due to softtissue contusion served as group a; and those suffered from stab or slash by sharp instrument injury as group b. group c, consisted of 25 healthy subjects who came for body check, as controls. peripheral plasma il6, il8 and tnfα were detected by elisa method. results the levels of il6 in groups a and b increased, more obviously in group a, with statistical differences among the three groups (f=21.750;q=3.559-6.994;p<0.01). in group a, il8 rose dramatically, compared with groups b and c (f=55.314;q=7.382,7.843;p<0.01), and tnfα elevated markedly compared with that of groups b and c(f=3.504;q=2.024,2.393;p<0.05). conclusion bleeding caused by acute contusion is easier than stab wound to produce the changes of il6, il8 and tnfα levels, which indicates that acute blood loss leads to a great quantity of inflammatory factors secreted by immunocytes, aggravating tissue injuries.

　　[key words] wounds and injuries; hemorrhage; interleukin6; interleukin8; tumor necrosis factoralpha

　　白细胞介素6(il6)、白细胞介素8(il8)和肿瘤坏死因子α(tnfα)为促炎细胞因子，具有局部和全身作用，能限制损伤和炎症的扩大，并为组织愈合和修复提供适宜的环境，而组织损伤程度与细胞因子有一定的相关性。有关急性失血和休克不同时期 il6、il8和tnfα的变化国内外尚少见报道。本实验通过测定急性创伤出血时上述细胞因子含量变化，旨在为创伤失血性休克与细胞因子相关性提供理论依据。现报告如下。

　　1 对象和方法

　　1.1 对象

　　选择急诊入院的急性创伤出血病人50例，血压9.31～17.29 kpa，心率80～120 min-1，血红蛋白80～120 g/l，累计失血量均在200 ml以上。其中软组织挫伤伴出血组(a组)25例，男19例，女6例;年龄18～60岁;车祸或外伤导致骨折并出血17例，外伤血气胸3例，坠落伤1例。锐器刺割伤致出血组(b组)25例，男15例，女10例;年龄18～60岁;其中失血大于500 ml引起休克者4例。以健康体检者25例作为对照组(c组)，男14例,女11例，年龄18～60岁，近期无明显感染疾病史。

　　1.2 方法

　　均于外伤后30 min内采集外周血，离心，取血浆，-20 ℃冰箱保存。采用酶联免疫分析(elisa)法在biotek elx800型酶标仪(美国宝特公司)上测血浆il6、il8和tnfα 的吸光度(a)值，以a代表其浓度，试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司提供，按说明书进行操作。

　　1.3 统计学处理

　　采用spss 16.0及ppms 1.5[1]统计软件对数据进行处理，数据以±s表示，多组间比较采用方差分析。

　　2 结 果

　　2.1 各组il6水平比较

　　a、b、c组il6 a值分别为0.645±0.445、0.319±0.109和0.160±0.030，a组与b组il6水平均升高，且a组升高明显，3组之间比较差异均有极显著性(f=21.750,q=3.559～6.994，p<0.01)。

　　2.2 各组il8水平比较

　　a、b、c组il8 a值分别为0.408±0.224、0.073±0.036和0.051±0.039，a组il8水平明显升高，与b、c组比较差异均有统计学意义(f=55.314，q=7.382、7.843，p<0.01)，b组与c组比较差异无统计学意义(q=2.025，p>0.05)。

　　2.3 各组tnfα水平比较

　　a、b、c组tnfα a值分别为0.517±0.172、0.421±0.159和0.423±0.089，a组tnfα水平明显升高，与b、c组比较差异均有统计学意义(f=3.504，q=2.024、2.393，p<0.05)，b组与c组间比较差异无统计学意义(q=0.054，p>0.05)。

　　3 讨 论

　　目前，有关创伤免疫机制研究日益受到国内外学者的关注。创伤是急诊医学中常见临床病症，创伤和大失血会引起机体一系列反应，可以直接引发细胞因子活性改变[23]。促炎细胞因子il6、il8、tnfα在急性炎性反应中起重要作用，它们可促进机体过度炎性反应，加剧机体的损伤[4]。本文对临床上失血量较大，血压、心率和血红蛋白等均已发生改变的急性创伤出血病人il6、il8和tnfα水平进行检测，结果显示上述因子水平均较正常对照组升高，而且a组 il6、il8和 tnfα表达较b组增高更加明显，表明急性创伤出血引发或伴发了细胞因子变化，而且挫伤进一步加剧细胞因子的变化，借此可以帮助临床解释为何挫伤伴失血比单纯失血更易引发难治性失血性休克。并提示il6、il8和tnfα在急性创伤和失血应急反应中发挥了重要作用。

　　il6、il8和tnfα均为细胞因子网络中重要成员，具有广泛生物学活性。il6、il8、tnfα具有局部和全身作用，能限制损伤和炎症的扩大，并为组织愈合和修复提供适宜的环境。目前研究认为，创伤后巨噬细胞吞噬杀菌能力及抗原提呈能力下降，il6、il8等前炎性细胞因子分泌增加[5]。影响创伤后巨噬细胞抗原提呈能力及其活性因子的因素与一些前炎症递质如 pge2、paf、il10 释放增加有关[6]。创伤后il6和 il8水平对炎症具有双向作用，究竟发挥何种作用取决于其微环境局部的浓度和外部因子种类等因素，即形成炎症和抗炎作用[7]。在急性失血及休克后促炎细胞因子所以发生变化，原因可能为失血后急性循环血量下降、巨噬细胞激活诱使大量释放，组织器官缺血，诱发炎性细胞浸润、激活和细胞内atp含量下降，胞内ca2+水平增加，引起单核巨噬细胞系统产生细胞因子，致 il6、il8和tnfα水平升高[8];另一方面失血后可导致血管内皮细胞(vec)损伤，从而影响细胞因子活性[9]。此外，在细胞因子的网络中，在失血刺激下tnfα能产生多种病理效应以及影响 il6、il8等相关因子变化[10]。因此，控制创伤后il6、il8和tnfα水平可能对创伤的发展和结局有重要作用。

　　急性失血后可引起细胞因子活性变化，而创伤加剧细胞因子活性变化，因此创伤失血可进一步加速休克发生，这是因为早期 il1、il6和tnfα变化作为应激反应中的免疫因素持续过度的表达对机体产生“二次打击”，造成“过度炎症”，加剧免疫损伤，使休克向不可逆方向发展[1115]。

　　总之，急性创伤失血病人il6、il8和tnfα的水平明显增高，导致过度炎症反应，而il1、il6和tnfα协同作用可能进一步加重了急性失血及其休克后机体损伤的发生、发展，使失血性休克难以逆转，病情进一步加剧。因此，检测il6、il8和tnfα可作为判断病情、预后和疗效的一种指标，对创伤有效治疗具有重要临床指导价值。

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