摘 要：胆结石是临床常见病、多发病。人体胆结石的成份非常复杂，胆结石的主要成分为胆固醇和胆红素。了解胆结石的成因和发病机理，将引导我们找到治疗胆结石的科学方法。胆结石的成分分析，是有效治疗胆结石的重要前提。
关键词：胆结石 发病机理 定性分析 定量分析
引言 近年来应用红外光谱法结合化学分析方法将胆结石进行分类，找出快速鉴定胆石类型的途径，以便对症治疗，在临床的应用越来越普遍。现代的傅立叶变换红外光谱法有快速、分辨率高等优点，可用于胆结石的分类和快速检定分析。1 胆结石的分类 按结石发生部位不同，分为胆囊结石、肝内胆管结石、胆总管结石[2]。按结石化学成分不同，通常包括胆固醇结石、胆色素结石或二者的混合物，即混合型结石。1.1 胆固醇结石 外观呈白色，通常是圆形或卵圆形，表面光滑或呈颗粒状。此类结石多发生在胆囊内，由于胆固醇结石的发生与代谢有关系，故又称之为代谢性结石。1.2 胆色素结石 多数以胆红素钙为主。其中黑色素结石的外观不定型、表面光滑、质地坚硬，主要成分是色素聚合物、硫酸钙、磷酸钙，多发于胆囊内[4]；胆色素钙常呈棕黄色小颗粒状，质地松软，主要成分是胆固醇、胆色素钙、脂肪酸钙，多发生于胆管内。1.3 混合性结石 主要成分也是胆固醇、胆色素、钙盐，其外形呈多面角形，表面光滑，呈深绿色或棕黄色颗粒，往往数目较多，排列整齐，其切面多呈环层状，亦多发生于胆囊内。2 胆结石的主要成分 人体胆结石的成分非常复杂，胆结石的主要成分为胆固醇和胆红素，此外还含有磷脂、蛋白、胆酸、游离脂肪酸及钙、镁等无机元素[3]。根据其胆固醇和胆红素含量不同，胆石可分为胆固醇型及胆色素型等不同类型。3 胆结石的成因及发病机理 人体内大量的胆固醇来源于各组织的形成，只有小部分是来源于食物中。形成胆固醇结石的主要物质基础是胆汁的过量饱和。假如胆汁内含有过高的胆固醇，胆汁就会很黏稠，长期留在胆囊内沉淀成硬块而形成胆结石[6]。 肝胆对胆固醇的合成越多，胆固醇变成胆汁酸的速度就越慢，这样胆固醇太过于饱和，就会与胆汁酸比例失调。这种状态持续下去会发生阻塞性黄疸，过量的胆汁酸进入人体，通过体内循环，胆汁酸会增多，就会有过多的胆汁酸排除体外，从而造成肠肝循环减慢，胆固醇的溶存度也因此而降低。浓缩的胆汁，由于很黏稠，排除受到极大阻碍，长时间淤积在一起，胆汁成分比例就开始失常。由于胆固醇含量高容易在胆囊粘膜上沉积，影响胆囊中黏蛋白的分泌，黏蛋白可以把胆固醇结晶和胆红素钙较强地黏合在一起，更易于形成胆结石[1]。4 胆结石成分的定性分析4.1 化学分析法 胆结石中的胆固醇及胆红素对特定的化学试剂有不同的颜色反应，利用反应后的颜色深浅或其他变化来大致检测胆同醇和胆红素的含量对胆结石进行分类，方法简易快速、结果可靠，适于一般临床工作中的胆结石快速分类。4.2 红外光谱法 胆结石的主要成分胆固醇和胆红素都有非常特征的红外光谱，用红外光谱法很容易鉴别。红外光谱似化合物的指纹，可不改变混合物的体系组成进行成分分析。而胆结石未加分离情况下的红外光谱是胆结石内各成分吸收峰的机械叠加，根据吸收峰的峰位、强度、形状与标准品红外光谱图或对照图谱比较，即可判断胆结石的主要成分。4.3 电子自旋共振谱(ESR或EPR)分析法 鉴于胆结石中含有的过渡金属离子及胆色素类组分都可能有ESR信号，有人做了胆结石ESR谱的初步研究，表明色素型结石有其独特的ESR谱，而胆固醇型结石中的胆红素类物质和过渡金属离子含量都很少，因而这类胆结石没有或只有很弱的ESR信号，故ESR谱可用来区别胆结石类型[3]。5 胆结石成分的定量分析5.1 胆结石中胆固醇含量测定[2]5.1.1 化学法 用乙醚从胆结石中提取出胆固醇，蒸干后加无水乙醇溶解，加入硫酸铁显色剂，胆固醇与三价铁形成紫红色化合物，550 nm波长下比色法测定，与同样处理之标准品比较，即可求得胆结石中胆固醇的含量。5.1.2 薄层扫描法 胆结石粉末用氯仿一无水乙醇(35：15)另加1滴浓盐酸溶解后，在高效硅胶薄层板上点样，以二甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(1．6：0．2：0．1)作展开剂，用50％ 硫酸乙醇液显色后于薄层扫描仪上扫描。5.1.3 傅立叶变换红外光谱法 在有机化合物仪器分析中，应用红外光谱分析方法的特点，可进行各种气体、液体和固体的定量分析 。应用红外光谱技术对胆结石进行定性、定量分析，可不经分离而直接测定，亦可避免加入其他化学物质的影响。5.2 胆结石中胆红素含量测定5.2.1 重氮化法 胆结石中的胆红素经盐酸浸泡后，才能被氯仿溶解而提取出来，被提取出来的胆红素与欧立区重氮试剂偶氮化，形成偶氮胆红素，呈红色，溶于甲醇中，于540 nm波长处比色测定，与同样处理的标准管比较．即可求得胆结石中胆红素的含量 。5.2.2 分光光度法 该法采用醋酸-氯仿(1：4)为溶媒，把胆结石直接溶解即可得透明液，在453 nm波长处测定吸收度。结果表明本法线性关系良好，精密度、回收率和稳定性也都令人满意，且方法较重氮化法更为简便易行。5.2.3 傅立叶变换红外光谱法 前面已提到应用红外光谱法可根据胆结石中各种分离成分的特征进行定性，对于定量分析可选取不相干扰的特征峰或干扰小的特征峰进行测定。参考文献[1]宋薏芳等．傅立叶变换红外光谱技术及应用研讨会论文集(-)，海洋出版社，1993，102-110[2]张洪昌等．胆红索，胆素生产技术．科学技术文献出版社出版．1998(10)[3]王君，韩建涛，张扬. 胆结石治疗方法研究的现状与展望[J]. 右江医学，2002，30（6）：521-522.[4]吉毅峥，简文豪，刘英棣. 胆结石直接溶石术的现状和进展[J]. 中华超声影像学杂志，2002，11（2）：117-119.[5]李晶石，杜丽绢. 胆结石溶石治疗[J]. 吉林医学院学报，1999，199（1）
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