第一篇:抗癌中药对肺癌标记物表达的影响及其疗效分析
癌细胞的微转移是肺癌术后复发的重要因素,及时发现微转移对肺癌复发和预后的判断有重要意义,对指导临床治疗也有特殊价值。目前,检测循环肺癌细胞的标记物中以CEA阳性率及表达率最高 ,在肺癌中55%表达。而且它具有较高的敏感性及特异性,所以CEA mRNA是十分适合检测循环肺癌细胞的标记物[1]。
因此,我们用聚合酶链反应(PCR)检测对照组和中药组肺癌患者CEA mRNA基因的情况。
1 材料和方法
1.1对象
2004年12月~ 2005年8月,我院确诊的肺癌患者80例,均为ⅢB和Ⅳ期,男56例,女24例,年龄34~73岁。随机分为两组,实验组:手术、化放疗加中药40例,化疗用GP和TP方案,6个疗程后胸部适形调强放疗,同时注射中药6个疗程;对照组:手术、化放疗但未注射中药40例。放疗以可见肿瘤为靶区,照射总量达60 Gy,缩小区野避开脊髓,对于有转移灶的Ⅳ期患者采用姑息放疗30 Gy,放疗要使胸腔积液消失或减少后开始。药物:抗癌中药注射液由纯中药制成,由斑蝥、七叶半枝莲、黄芪、人参、刺五加等为配方。
1.2方法
1.2.1 RNA抽提采用Trizol抽提法。Trizol试剂购自Invitrogen公司。取抗凝外周血20 ml,经白细胞分离液无菌分离后,然后经1%琼脂糖凝胶电泳鉴定RNA质量和提取量,置-80℃待用。
1.2.2 引物合成序列为,①逆转录引物。B:5' TGTAGCTGTTGCAAATGCTT TAAGGAAGAAGC 3';②PCR引物。A:5' TCTGGAACTTCTCCTGGTCTCTCAGCTGG 3';B:5' TGTAGCTGTTGCAAATGCTT TAAGGAAGAAGC 3';C:5' GGGCCACTGTCGGCATCATGATTGG 3'。PCR反应在两个体系中进行,第1轮引物为A+B,第2轮引物B+C,PCR产物长度为152 bp。③内参对照β-actin引物。正义引物5' CATTGTGATGGACTCCGGAGACGG 3’;反义引物5' CATCTCCTGCTCGAAGTCTAGAGC 3'。
1.2.3 逆转录反应1 μg的标本RNA和100 ng逆转录引物在70℃下变性5 min,然后加核酸酶抑制剂25 U (pramega),4种核苷酸(dNTP)0.5 mmol/L,逆转录酶2 U,在42℃下反应60 min。
1.2.4 聚合酶链式反应第1轮PCR以逆转录产物2 μl,加引物A+B,dNTP 200 μmol/L,Taq DNA聚合酶1.5 U,在DNA扩增仪上,94℃ 40 s,55℃ 30 s,72℃ 30 s,扩增35个循环。第2轮PCR以第1轮PCR产物2 μl,加引物B+C,其他条件相同,扩增30个循环,第30周期后72℃延伸10 min。每次扩增均设空白阴性及阳性对照。PCR产物经2%琼脂糖凝胶电泳,以分子量标准带鉴别PCR产物位置。
1.2.5观察有效率每2个疗程复查CT评价瘤体大小,按照WHO评价标准,治疗效果评价为:临床缓解(CR),部分缓解(PR),临床无变化(SD),临床进展(PD)。
1.3统计学处理
实验数据采用SPSS软件分析,统计方法为χ2检验和两个独立样本非参数检验,P<0.05为差异有显著性。
2 结果
2.1抗癌中药治疗前后CEA mRNA基因在各期肺癌的检出情况
对照组40例病人治疗前22例阳性,治疗后18例阳性;而实验组40例患者治疗前24例阳性,治疗后9例阳性(P<0.05),两组共80例。中药联合手术、放化疗后CEAmRNA阳性率有所下降,见表1和图1。
2.2抗癌中药治疗有效率
对照组临床有效率为72.5%,实验组为80%。抗癌中药联合手术、放化疗能提高临床有效率(P<0.05)。两组治疗前无显著性差异(P>0.05),见表2。
3 讨论
肺癌为我国发病率较高的恶性肿瘤之一,但是发现时60%以上的患者已失去手术机会。近年来,含铂类的联合化疗能延长患者的生存期,肺癌的治疗多采用外科手术及应用化疗药物等方法。中医药是肺癌综合治疗的一个环节。中医认为本病属脏腑失调,正气虚弱,气滞血瘀,邪凝毒聚而成。针对本病正虚邪实的病机特点,我们用抗癌中药辅助手术、放化疗治疗呼吸系统肿瘤,全方具有补益肺肾、清热解毒、消瘀散结的功能。
用手术、化放疗联合中药注射液6个疗程后,外周血CEA mRNA从术前60%下降到术后22.5%,而对照组从55%下降到45%,对照组和实验组治疗前状态无显著性差异,治疗后实验组与对照组比较,CEA mRNA明显下降(P>0.05),两组治疗前分期和化放疗均按本院常规,无差异。接受中药联合治疗的患者缓解持续时间延长,缓解率达85.0%,而对照组72.5%。本组所以能达到阳性率下降,与本研究检测的是外周血有关,肿瘤细胞核酸释放到循环血而被检测到呈较低数量级,血中基因的含量转阴,可能原发部位还有病灶,只是并没释放入血或未被检测到而已。CEA mRNA在肿瘤细胞及某几种特定细胞中有高水平的表达,正常体细胞与非肿瘤炎性细胞几乎不表达 CEA mRNA。已知游离于细胞外的mRNA很不稳定,极易被Rnase降解,外周血检测到肿瘤特异或其相关基因的mRNA就提示血液中存在完整的能表达该mRNA的细胞。肺癌与其他肿瘤一样,血液播散是重要特征之一,严重影响治疗和预后[1]。
Guadagni等发现,各期肺癌患者,35%血清CEA阳性,而69%有CEA mRNA表达;更重要的是,Ⅲ和Ⅳ期患者只有20%血清CEA升高,而70%有CEA mRNA阳性,为什么CEA-CEA mRNA系统表达量呈不同步性,可能是肿瘤基因组调控紊乱,CEA mRNA转录系统过于活跃,导致CEA mRNA过量转录,而CEA合成系统未能被同步激活或失控的转录系统合成大量的无模板功能的CEA mRNA,出现CEA表达低于CEA mRNA表达的现象[2]。中药治疗组细胞亚群CD8下降明显、CD4/CD8比值、NK细胞及血清IgG、IgM含量上升明显[3]。大连医科大学研究肺癌患者血清血管内皮生长因子(serum VEGF,sVEGF)的影响, 显示该药具有抗肿瘤血管生成的机制。可见抗癌中药是肿瘤综合治疗的重要部分,该药有显著的抗疲劳功能,具有抗癌、升白、提高免疫功能及对化疗药物有增效减毒作用,能够缓解中晚期肺癌患者临床症状,提高患者细胞免疫功能,改善患者生存质量,延长生存期。对复发或一线化疗失败的ⅢB/Ⅳ期非小细胞肺癌患者的观察提示,该治疗方案在近期疗效、中位生存时间、1年生存率、疾病无进展时间均有所提高,而且毒副反应轻, 中药扶正不助邪,患者食欲增加,患者容易耐受,生存质量得到明显提高,使患者增加了对化疗的信心,有利于患者坚持治疗[4,5]。
微转移是一个独立的预后指标,分子学指标诊断检测肿瘤微转移对患者预后的判断优于肿瘤分级和分期,可对临床分期的精确、手术方式及清扫范围的确定、建立个体化辅助治疗方案起到重要作用,应用指标,对辅助诊断呼吸系统恶性肿瘤血行转移具有较高的实用价值。抗癌中药具有活血化瘀,散结止痛,清热解毒,扶正驱邪等功效,对肿瘤患者有缓解症状、缩小瘤体,抑制肿瘤生长,减轻痛苦,提高免疫力,延长生命的作用。
中国医药导报 2008年2期 作者:张洁霞 毛小玲 郑丽霞
第二篇:中药青蒿素 抗疟更抗癌
从青蒿中提炼出来的青蒿素是我国科学家独立研制成功的一种植物抗疟药,青蒿素类药物的应用,挽救了全球特别是发展中国家数百万人的生命,因此备受国际医学界的关注。除了抗疟以外,青蒿素类药物显著的抗肿瘤活性也受到越来越多的关注。
我叫青蒿素,是一种新型的抗疟天然药物。或许大家对我不是很熟悉,但是我的母亲大人可是大家所熟悉的青蒿,又名黄花蒿,最早记载于马王堆汉墓出土的《五十二病方》,是民间常用的药物,有截虐、消暑退热、治疗感冒、除虚寒、健胃、止血、杀虫等功效。虽然人们知道我的母亲有诸多功效,但是不知道其实我才是最大的“功臣”。
ZgJcc.Com
直到近年,我终于遇到了我人生的伯乐——中国科学家屠呦呦,是她发现了我的才能,并想方设法让我完好无损地从母亲身体里“分娩”出来。咱俩因此收获都不小,我挽救了更多人性命,屠呦呦也因此获得了有诺贝尔奖风向标之美誉的拉斯克奖。
初露锋芒:抗疟
有人或许会质疑,有抗疟疗效的中药西药多得去了,你有啥好稀奇的?但是我要告诉大家,我不仅具有显著的抗疟疗效,抗疟机理与其他抗疟药也有不同。其他药物会干扰叶酸代谢,给人体带来一定的副作用。但是我不会,本着救人又不伤人这个目的,我有个新办法:通过干扰疟原虫的表膜——线粒体功能,从而导致虫体结构全部瓦解。正是由于我具有高效、快速、低毒、安全等显著优势,才得到大家的认可,成为世界卫生组织推荐的抗疟药品,特别是对脑型疟疾和抗氯喹性疟疾有很好疗效。
现在我的同类成分已被开发成各种药物,主要包括直接从植物黄花蒿中分离提取的具有过氧化基团的倍半萜内脂类化合物青蒿素及双氢青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚及蒿乙醚等青蒿素的衍生物。
开启新篇章:抗癌
我十分幸运,在被发现能抗疟之后,又遇到了许多伯乐,他们之后的发现让我又开启了新的篇章:抗癌!我的优点还不仅仅是对肿瘤细胞有杀灭作用,更重要的是我对于正常细胞几乎无细胞毒性,还可以通过阻滞细胞周期、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤新生血管形成、调节肿瘤相关基因的表达,以及损伤细胞线粒体等作用机制而实现抗肿瘤作用。他们研究发现,我独特的作用机制使青蒿琥酯对肿瘤细胞具有很好的靶向性,合用其他抗肿瘤药物后可以产生协同作用;将我与转铁蛋白共价结合的复合体,增强了我对肿瘤细胞的细胞毒性和选择性,是抗肿瘤药物治疗中一种非常有前景的药物;况且,我与传统化疗药相比,还具有来源广泛、价格低廉、抗癌谱广且毒副作用小等优点。
目前,我与我的兄弟姐妹的抗肿瘤活性已成为研究的热点,有希望被开发成为新型植物抗癌药,广泛应用于临床。毒理学研究表明,虽然我们也具有一定毒性,但基本都是可逆的。其中,我、蒿甲醚及青蒿琥酯在动物生殖毒性试验中均显示有胚胎毒性作用,基于这一点我还有望成为抗早孕药物;不过,我在动物实验时已证明具有神经毒性,虽然临床治疗中还没发现对人有神经毒性,可在大剂量重复给药的情况下,应密切关注患者可能出现的神经毒副反应,保证更安全地用药。
家庭医药·快乐养生 2013年3期 作者:刘娟
中国论文网(www.lunwen.net.cn)免费学术期刊论文发表,目录,论文查重入口,本科毕业论文怎么写,职称论文范文,论文摘要,论文文献资料,毕业论文格式,论文检测降重服务。