第1篇:探讨中药真伪鉴别中电泳分析的科学性
自1969年日本木岛正夫等人用电泳法鉴别杏仁、桃仁之后,众多药界学者纷纷在中药这一领域进行了探讨研究,使电泳图谱法在中药真伪鉴别中的应用得到迅速发展。特别是近几年来,电泳图谱法对中药真伪的检测得到进一步完善,从支持体上,不仅局限于聚丙烯酰胺凝胶电泳,还运用了乙酸纤维素薄膜电泳、等电聚焦电泳等;从药材种类上,以前动物类药材鉴别应用电泳法的报道甚少,近年来比较多,而且都得以准确鉴定/可见由基因控制的蛋白质分子为标准,进行电泳分析是科学的。
石俊英等通过对12种动物类中药的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,发现不同种动物药材的电泳图谱差异显著,同属动物药材如中国林蛙与黑龙江林蛙,外形相似不易区分的药材如鸡内金与鸭内金等,电泳图谱也各不相同。越曦等对种动物类药进行了凝胶电泳鉴别,不仅图谱差异显著,而且谱带稳定、重现性好。建议富含多种蛋白质动物药材的中药复方制剂,可建立标准蛋白电泳图谱,对复方制剂中的动物类药材进行真伪鉴别。赵华英等通过对羚羊角、羚羊角骨塞及其伪品藏羚羊角、绵羊角、山羊角的电泳图谱鉴别,发现不仅正品与伪品差异显著,即使同一种药材,部位不同其谱带亦有差异。如羚羊角骨塞共有2条谱带,尤其是A2区有二级带1条,而羚羊角无,从而将药用部位与非药用部位区分开来。可见电泳图谱法在鉴别中药真伪方面具有独特的优越性。这种优越性体现在方法简便,操作容易、鉴别迅速、区分明显。再如柳雪枚等用超薄等电聚焦电泳法和高PH不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳法,分析了养香与天然磨香抗炎多肽蛋白质;鞠爱华等用电泳法正确鉴别了蛤蚧及其伪品壁虎,无蹼壁虎、喜山m蜥、疣螈;滕茜华用乙酸纤维素薄膜电泳法成功鉴别了乌稍蛇与白花蛇!程丽敏等用电泳图谱法
准确鉴别了冬虫夏草及其伪品草石蚕、地笋、地蚕、僵蚕、机制虫草。所有这些是以动物药材中所含的蛋白质,作为电泳图谱法鉴别真伪的基础,同样,果实种子类和根及根茎类药材中所含的蛋白质也可以作为电泳图谱法鉴别真伪的基础。在这方面近年来也有新的进展。最具代表性的如:刘惠娟等通过对不同产地的蛇床子的电泳分析,发现其电泳图谱仅存在微小差别,与形态学基本一致;还分析了20种贝母类药材,发现电泳谱带的差异在原变种与变种之间也能反映出来,如鄂北贝母与紫色鄂北贝母、浙贝母与东贝母等。同种植物栽培品与野生品谱带也存在差异,如浦圻贝母与裕民贝母。聂桂华等通过对不同加工方法的山药的电泳分析,认为同种药材加工方法不同会引起谱带色泽变化。黄哲1赛等用等电聚电泳法准确区分了紫苏子及其混淆品荠羊子。
显然,电泳图谱法不仅能够鉴别中药真伪,还能够为植物分类学提供科学的依据。它具有其它方法所不可比拟的高分辩率,这种高分辩率表现在正品与伪品之间、原变种与变种之间。栽培品与野生品之间、药用部位与非药用部位之间、同种药材不同加工方法之间。
中药材种类繁多,伪品、混淆品不仅影响人民群众昨安全用药,还一直困扰着广大中药基层工作者。电泳图谱法的应用无疑为正确鉴别中药材提供了有力的手段,随着电泳图谱法理论的不断完善和实验的不断进展,相信,以基因控制的蛋白质分子为标准的电泳图谱库必将建立,为中药材及其制剂的检测开辟新纪元。
作者:石柄娟(山东省潍坊市药品检验所,251041)
第2篇:鉴别中药真伪的技术——光谱成像技术
为了鉴别中药真伪,光谱成像技术应用十分广泛,该技术主要原理为将光谱分析与图像处理两种技术加以结合,近年来该技术发展较快成为应用较广的中药检测技术,即采用光谱图像扫描与分析技术来获取不同试样在不同波长下的光谱学信息,然后这些光学信息又经过计算机软件处理后而得到不同试样的光谱图像,而且根据所得到的图像来获得试样的定性及定量等方面的信息。运用此技术,不仅能够获取试样光谱维的相关信息,而且还能够获取空间维的相关信息,具有操作简单,速度快,且对药物成分无损坏等方面的优点,因此在中药真伪鉴别中得到较为广泛地应用。本研究主要采用该技术鉴别中药的真伪,得到了互补相同的特征光谱曲线。现将结果报道如下。
1仪器与试剂
中药检测光谱成像系统:摄像机、镜头组、视频采集卡、液晶电可控滤光器以及计算机等;花类中药材粉末三种:凌霄花、红花及菊花,均采取我市药检所提供的对照药材,购买时间分布为2011年11月3日与2012年8月5日。
2方法与结果
2.1实验条件与方法
将波长为254nm的汞灯作为激发光源,扫描方式为单通道与连续光谱扫描,直接对中药材进行扫描即可检测出来。光谱扫描范围大小为400〜650nm,然后使用可控滤光器进行分光处理。将CMOS摄像机成像镜头进行一定的调整,使得波长为550nm位置的焦平面与试样所在光谱曲线平面之间互相重叠,然后将摄像机的曝光时间设置为1000ms,然后对光谱图像进行采集分析,摄像机所采集图像以JPEG图片格式存储于计算机之中。
2.2特征光谱曲线的获得
不经过任何途径及方法的处理,直接将被测中药材试样放在载物台的衬底上面,根据上述实验条件及方法加以检测。在对上述各种中药材的光谱立方体获取后,然后应用滤波器对噪声加以去除,从而对各种中药材试样所对应的像素值进行统计,并取平均值,最后对数据进行归一化处理,最终获得各种中药材的特征光谱曲线图。
2.3三种中药材的特征光谱曲线
本研究中三种中药材花的特征光谱曲线分别。
2.4方法学考察
2.4.1稳定性实验
首先取一定量的同一种供试品,每隔24h进样1次,根据2.1与2.2节中的方法对三种花类进行检测分析,连续对其检测5次,比较上述三种花类的特征光谱曲线。得出如下结果:三条花类的曲线峰形的相似度均在0.94以上,且各自的特征峰位未见任何改变,此结果提示,本试验稳定性较为理想。
2.4.2精密度实验
首先取一定量的同一种供试品,然后根据2.1与2.2节中所描述的方法进行检测,重复检测5次,比较各花样的特征光谱曲线。得出如下结果:三条特征光谱曲线峰形的相似度均在0.94以上,且其特征峰也保持不变,且各个特征峰光强波动的不确定度矣1.86的测量值,此结果提示此方法精密度较为理想。
3讨论
本研究实验样品均来源于国家权威检测部门,而且事先已进行稳定性与精密度等方面的实验。由此可以得知,这些对照性实验样品的归一化特征曲线具有唯一性,能够作为日后创建标准化的中药材真伪鉴别数据库,对于同一种中药材而言,则可根据该归一化曲线来对其进行检测,通过比对,来验证该中药材的真伪,以提高医院中药材的质量及级别p'51。
由本研究中三种中药材花的特征光谱曲线图可以得知,三种中药材粉末的归一化特征光谱图具有较大的差异性,也就是说三种中药材粉末的光谱图是唯一的。由红花与凌霄花的归一化特征光谱曲线可看出,二者均具有偏峰结构,红花曲线归一化强度为L.0,且荧光强度在峰顶位置变化非常大;凌霄花的特征曲线的归一化强度为0.89,但与红花不同的是,其荧光强度在峰顶附近的改变量较小。
本研究结果显示:三条花类的曲线峰形的相似度均在0.94以上,且各自的特征峰位未见任何改变;三条特征光谱曲线峰形的相似度均在0.94以上,且其特征峰也保持不变,且各个特征峰光强波动的不确定度矣1.86的测量值。此结果提示该方法具有较好的稳定性与较高的精密度。
综上所述,光谱成像技术在中药真伪鉴别方面效果佳,样品在鉴别时,不要进行前处理,而且该方法鉴别中药操作十分简单,速度快,且对药物成分无损坏等,应在实际过程中加以推广及应用。
作者:王路(河南省南阳市中医院药剂科,河南南阳4730IJ0)
第3篇:中药真伪鉴别的方法探讨
1太子参
1.1正品为石竹科植物孩儿参的干燥块根。呈细长纺锤形或长条形,稍弯曲,长2~10cm,直径2~6mm。表面黄白色,微有纵皱纹,凹陷处有须根痕,顶端有茎基及芽痕。质硬而脆,易折断,断面平坦,类白色,刮之有粉(晒干品);或黄白色,角质样(烫制品)。气微,味微甘。
1.2伪品
1.2.1白花紫萼女娄菜为石竹科植物白花紫萼女娄菜的干燥块根,本品顶端有多数疣状突起的芽痕,表面纵皱纹明显。
1.2.2宝铎草为百合科植物宝铎草的块根。本品多为数个簇生,单个与太子参相似,但顶端有疙瘩状茎基,断面有黄白色细木心。
2天麻
2.1正品为兰科植物天麻的干燥块根。呈长椭圆形,扁缩而稍弯曲,长5~13cm,宽2~6cm,厚1~3cm。一端有红棕色干枯芽苞,习称“鹦哥嘴”或“红小辫”。或为残留茎基;另一端有自母麻脱落后的圆脐形瘢痕。外皮剥落或部分残存,表面黄白色或淡黄棕色,具环节,有点状痕点或膜质鳞叶,有纵皱纹。质坚实,半透明,不易折断,断面较平坦,角质样。气特异,味甘、微辛。
2.2伪品
2.2.1马铃薯为茄科植物马铃薯的干燥块根。经去皮加工后形状较似天麻,顶端留有茎基痕,底部无圆形瘢痕,表面也无点状环纹,干透后有细裂缝。薄壁细胞中不含草酸钙针晶,而含砂晶,并含大量糊化的淀粉团块。
2.2.2紫茉莉为紫茉莉科植物紫茉莉的干燥根。呈长圆锥形,稍弯曲,顶端有茎基痕,有的有分枝。组织中在中柱部分可见数至十数轮异常维管束,间断排列成环。薄壁细胞中含大量的草酸钙针晶束,并有糊化的淀粉团块。
3北沙参
3.1正品为伞形科植物珊瑚菜的干燥根。呈细长圆柱形,偶有分枝,长15~45cm,直径0.3~1.5cm。上端稍细,常留有黄棕色根茎残基,中部略粗,尾部渐细。表面淡黄白色,粗糙,全体有细纵皱纹或纵沟,并有棕黄色或白色点状皮孔和须根痕。质坚硬脆,易折断,断面皮部浅黄白色,木质部黄色。气特异,味微甘。
3.2伪品
3.2.1田黄蒿和硬阿魏为伞形科植物田黄蒿和硬阿魏的根。根呈圆柱形或纵剖成条形;根头部有明显的凹陷茎基痕;断面皮部土黄色,木部鲜黄色。
3.2.2麦瓶草为石竹科植物麦瓶草的跟。根加工后,多为单支,外皮已除去,表面光洁而细腻,有灰棕色的须根痕。4.2.3石沙参为桔梗科植物石沙参的根。根常因加工而呈扭曲状,多单一;根头部有盘节状的茎痕。
4血竭
4.1正品为棕榈科植物麒麟血竭及同属他种植物果实中渗出的红色树脂或百合科植物海南龙血树的含脂木质部提取而得的树脂。国产血竭:呈不规则块状,大小不一;精制品呈片状。表面呈紫色,具光泽,局部有红色粉尘粘附。质硬,易碎,断面平滑,有玻璃样光泽。气无,味微涩,嚼之有粘牙感。本品不溶于水,在热水中软化。易溶于乙醇、二硫化碳、氯仿及碱液中。
4.2伪品松香伪制血竭外表与正品相似,颜色比正品浅,用火烧,冒浓黑烟,并有明显的松香气味。取少许伪品粉末用水溶解,水染成红色。用嘴嚼正品味淡而后咸有沙砾感。伪品嚼之粘牙有松香味。
5小结
中药是我国劳动人民千百年来智慧的结晶和宝贵财富,继承和发扬中药鉴别的优良传统和宝贵经验,熟悉中药来源及性状鉴别要点,掌握简便、快捷行之有效的真伪识别技巧,分明清浊、去伪存真,是中药鉴别的当务之急。为中药的品种鉴别提供可靠的技术保障,确保中药在临床疗效、实验研究及患者生命安全等方面,具有积极深远的现实意义。
作者:陈品英,刘建魁(050011河北省中医院)
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